1.诊断：
1.1.临床表现。
1.2.母、婴血型不合。
1.3.产前诊断
1.3.1.孕妇O型或Rh阴性，丈夫为A(或B)型或Rb阳性，胎儿有可能发病。
1.3.2.妊娠l6周、28周孕妇血抗Rh抗体滴度上升。
1.3.3.穿吸羊水有胆红素增高可确定有溶血。
1.4.新生儿免疫性溶血性贫血的实验室检查
1.4.1.血象示不同程度贫血、网织红细胞增多，血涂片中嗜多色性红细胞增多和红细胞大小不匀较为明显。新生儿免疫性溶血性贫血严重时白细胞可增高及桉左移。血小板计数正常或降低。骨髓象示红细胞系明显增生。
1.4.2.血清胆红索在生后24小时内出现增高者占65%，以非结合胆红素增高为主。脐带血胆红素可不增高，可能与母体能帮助排出胆红素有关，出生后失去胎盘排除胆红素的能力，使新生儿血内胆红素含量迅速升高。血清胆红素>O 3g/L.时核黄疸的发生率为50%。
1.4.3.免疫学检查：Rh溶血病新生儿直接抗人球蛋白试验常呈强阳性，并持续数周，对新生儿Rh溶血病的诊断具有重要意义。母亲血清与病儿红细胞(或其丈夫红细胞)做术瓜酶试验、间接抗人球蛋白试验、胶体介质试验均呈阳性，表明母亲血清中有Rh血型抗体存在，对诊断有参考意义。ABO溶血病时，以病儿红细胞做直接抗人球蛋白试验常为阴性或弱阳性，而用有较高效价的抗人球蛋白血请则可提高阳性率。利用患儿血精中的游离抗体与成人红细胞做间接抗人球蛋白试验常呈阳性，利用乙醚或加热将息儿致敏红细胞上的抗体释放出来，然后用标准红细胞来确定抗体的特异性，阳性者均有助于诊断。
2.鉴别诊断：
2.1.纯合子α-TS：可致胎儿水肿，Hb电泳为Hb Bart’s可区别。
2.2.HS：也为球形红细胞增多，但母婴无血型不合。
2.3.新生儿生理性黄疸：黄疸多开始出现于出生后第三天，不伴有贫血和肝肿大。外周血中如有有核红细胞出现，其数量一般不多，2～3天内即消失。出生后24h内发生的黄疸几乎都是溶血病。
2.4.抗Ge3新生儿免疫性溶血性贫血：抗Ge3抗体阳性母亲所生的新生儿发病。DAT阳性，黄疸轻，不需输血。
2.5.婴儿固缩红细胞增多症：黄疸、一过性溶血、无脾大，于3～4周达高峰，4～6个月消失。黄疸于出生后1～5d发生，偶可>28d，确诊常在出生后11～33d。
2.6.G-6-PD缺乏引起的新生儿黄疸：新生儿在出生时并无黄疸，至出生24小时后黄疸和溶血性贫血方开始出现，而新生儿同种免疫溶血病在出生时黄疸和贫血已经存在。明确的鉴别需根据实验室检查如新生儿及其父母的血型鉴定、有关血清学检查、有关G-6-PD缺乏的各项检查等。
2.7.先天性胆管阻塞：此病患儿并无贫血、无网织红细胞和有核红细胞增多。黄疸至婴儿出生后2～3周始加重，粪呈灰白色，尿中有大量胆红素，血清中结合胆红素显著增多。
2.8.其他：如新生儿有严重感染或脓毒血症、血肿吸收和先天性胆红素代谢障碍等均可发生黄疸，但一般鉴别并无困难。
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