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环状病毒感染 (环状病毒感染,环状病毒,病毒感染)

环状病毒感染的诊断

  实验室检查

  1.空斑测定(plaque assay)

  是检测Palyam血清型环状病毒中Chuzan病毒敏感而适用的方法。所用细胞为BHK-21细咆。在接种后7.5小时首先观察到细胞病变作用,12小时完成。接种后4.5小时用间接免疫荧光法在细胞浆中可检出病毒特异抗原,7.5小时整个感染培养物可检出血凝活性。

  2.血清学检测

  (1)间接荧光抗体测定(IFA):可用于检测AHSV抗体。抗体在接种疫苗后7日出现,至少持续6个月。该方法敏感、特异、迅速,操作相对容易,优于补体结合和中和试验。适用于AHSV的控制和监测。

  (2)酶联免疫吸附测定(ELISA):间接夹心ELISA可检测所有9个AHSV血清型.可检出至少8ng的AHSV。竞争ELISA(c-ELISA)可用于检测AHSV、EHDV和BTV特异性抗体。间接夹心ELISA可检测病毒抗原有助丁早期诊断。

  (3)琼脂扩散试验(AGID):用于检测BTV抗体,特异性和敏感性均较高。

  (4)血清中和试验(SN):该试验特异性好,但敏感性较低。由于多种血清型有交叉反应。在有多种血清型存在的地区,评价血清型时血清中和试验的结果应慎重解释。

  3.分子生物学检测

  (1)RNA聚丙酰胺凝胶电泳和斑点免疫结合测定:该2种方法可用于细胞培养中病毒的检测。

  (2)环状病毒RNA检测:常用分子杂交和RT-PCR方法。扩增编码AHSV NS2蛋白的基因作RT-PCR可鉴别AHSV所有成员和马脑病病毒的各血清型。AHSV、BTV和.EHDV均可用RT-PCR方法检测。血清型特异RT—PGR和原位RT—PCR及实时RT-PCR均有报告,该方法迅速而特异。RT-PCR不仅用于早期诊断、血清型鉴别,还可用于流行病学研究。

  诊断和鉴别诊断

  凡临床上遇到“无名热”和脑炎的病人应想到环状病毒感染,及时作环状病毒抗原、抗体和病毒RNA检查,以便早期确诊:临床上应与伤寒、斑疹伤寒、其他病毒感染、钩端螺旋体病、粟粒性结核病、败血症及恶性组织细胞病、其他病毒性脑炎等进行鉴别。因本病无特异性表现,故必须依靠病原学、血清学及病毒RNA检查进行鉴别。

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