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非甲-庚型肝炎的诊断

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　　实验室检查

　　目前国内外学者大多根据TTV的ORF1保守区设计引物采用巢式或半巢式聚合酶链反应检测TTV。研究发现.引物的设计是影响TTV基因型检测的重要因素，采用两套引物对TTV基因进行了分析.同时采用Southern杂交技术进行了辅助检测。结果发现引物1和引物2单独使用和同时使用检测的基因型均不一样，单独使用时会降低基因型的分辩率。为正确分析人群中TTV的感染率。在保守区设计一条可检测到多种基因型的多态性引物是非常必要的，也可以在病毒基因组中3个独立的区域设计丁3对套式引物.且处于病毒基因的非编码区。检测结果发现比原先报道的方法要灵敏得多，大大地提高了TTV的检出率。利用PCR方法检测TTV DNA应注意以下几个问题：①引物设计：要选择相对保守、变异较少的区段，为提高检出率，最好能设计不同区段的引物进行扩增，互为补充。②TTV在血清中的滴度远低于HBV和HCV，为提高检测敏感性必须优化核酸提取的办法并采用二次PCR。用ELISA法检测TTV抗体已在研究中，但是敏感度较低，与TTV DNA结果相差较大。目前TTV的诊断仍主要依据PCB。

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