单纯疱疹病毒如何进行病毒分离？
- 发布时间：2017-08-07 08:24:42
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单纯疱疹病毒是一个容易感染人体的病毒，在感染人头后，有一部分的患者会表现出症状，但是有一部分的患者是没有表现症状的。既然是一个病毒性疾病，那么就需要对人体中的这种病毒进行分离和检查，这样才能有效的研究出治疗它的方法。
病毒分离培养是当今临床上明确诊断疱疹病毒感染的可靠依据。单纯疱疹病毒的分离远离是以组织活细胞为母体，使活病毒得到扩增，引起宿主细胞病变(CPE)。可采集皮肤、生殖器等病变部位的水疱液、脑脊液、角膜刮取物、唾液等标本，接种人二倍体成纤维细胞株WI38及其它传代细胞株如Vero、BHK等，经24～48小时后，细胞则出现肿胀、变圆、细胞融合等病变。然后用HSV-1和HSV-2的单克隆抗体作免疫荧光染色鉴定或应用DNA限制性内切酶图谱分析来定型。
敏感的细胞系具有很高的标本检出率.经研究表明，在细胞培养中，只要有1-10个感染性HSV就可以检出，而ELISA和核酸杂交则需要104～106病毒颗粒，所以，细胞培养被广泛当作其它方法研究的参考--金标准。HSV可以在多种动物细胞中增殖，乳地鼠肾细胞(BHK)、非洲绿猴肾细胞(Vero)、人胚肺细胞(HEL)、原代兔肾细胞(PRKL)、恒河猴胎肾细胞(FRHK)、人胎包皮细胞(HFF)、貂肺细胞(ML)、人肺癌细胞(A549、人包皮成纤维母细胞(MRC-5)、人新生儿肾细胞(HNK)等。在前面7种细胞中，以PRK出现CPE早，其余依次是HFF、HEL、Vero。但各个实验室常以自已的条件，习惯来选择合适的细胞系。
利用活病毒在细胞内的扩增作用，再用免疫学技术进行快速诊断，如免疫荧光法(IFA)、免疫过氧化物酶法(IP)、生物素免疫荧光法(BA-IFA)等，缩短了细胞产生CPE结果鉴定标本的时间，并提高了特异性。需发现更好的细胞系，以便提高临床标本的总检出率;且实验室间方法及结果存在差异，需要进行方法学上的标准化;引进更灵敏的免疫学方法或其它技术，缩短时间、简化条件、提高特异性。
单纯疱疹病毒的分离是一项不容易的技术，现在还需要改进，以提高临床上的病毒检出概率，是机器对病毒的灵敏性更高。
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