乳糜微粒临床意义-家庭医生在线

检查分析

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正常指标：

　　阴性。

异常指标：

　　阳性。

检查分析：

　　1、免疫透射比浊法：

　　(1)标本应是及时分离的空腹血清，可密封存放在2～6℃冰箱中，1周内测定，-20℃可存放半年。

　　(2)用全自动分析仪时，应根据不同仪器设计参数，合理选择抗原抗体比例及反应时间。也可作速率法散射比浊测定CM如用Beckman比浊仪ICS或protein array system)。

　　(3)手工法所用仪器：精密光度计，具有340nm滤光片(或分光器)，样品池体积以0.5ml为宜(为节省抗血清)，最好用流动杯，样品稀释最好用稀释器、经校正的加样器。

　　(4)标本处理：将血清标本及质控血清各用样品稀释剂作1∶200稀释，即先作1∶20稀释(5.Oμl血清+95μl稀释剂)后，再作1∶10稀释(多余的1∶20血清作测定apoB用)。

　　混匀后，25～37℃放置30min，在波长340nm比浊，根据U-UB的A值，在标准曲线上读出结果。

　　本法批间CV<5%。

　　(5)校准曲线：在手工与半自动操作中每批测定均需作校准曲线，可将校准血清稀释成1∶100、1∶200、1∶300和1∶400等4种浓度，与标本同样操作，根据定值计算出每个标准管CM浓度，以浓度(X)与其相应的A值(Y)作图(用直线回归计算)，基本上成直线，但在Y轴上有一定截距，所以不能用单点标准。操作准确时浓度与A值的相关系数应在0.985以上。

　　如有高、中、低浓度的三份校准血清时，可与标本同样操作，做三点定标，也可作五点定标(即高、中浓度的血清等量混合，及中、低浓度的血清等量混合，成为另两份校准血清)。

　　本法线性范围：0.4～2.5g/L。

　　2、火箭电泳法：

　　(1)浇板：每板用10g/L琼脂糖10ml，沸水浴中融化，混匀，冷至50～55℃时加入CM抗血清50μl，apoB抗血清8μl(用量视抗血清效价而定)，迅速混匀后倒在预置在水平台上的玻璃板上，冷后放在4℃，20min后打孔，孔在板的阴极端，孔径3mm，孔间距至少5mm，孔容量5μl。把板放入电泳槽，用滤纸搭桥。

　　(2)稀释抗原：用0.15mol/L NaCl液将校准血清稀释成1∶100，1∶150，1∶200，1∶300，及1∶400(作校准曲线之用)，血清标本按1∶200稀释，放4℃冰箱不得超过3天。

　　(3)加样：在低电流状态(10mA/板)将稀释好的定值血清及标本分别吸取5μl(准确)，加入琼脂糖凝胶加样孔内。每板都要做一系列标准。

　　(4)通电：稳流24mA/板，端电压6～8V/cm，以流水冷却使琼脂糖保持15℃，电泳3～4h。

　　(5)脱杂蛋白及制干胶膜：电泳后的琼脂糖板浸泡在0.15mol/L NaCl中30min，将胶膜托置于聚酯薄膜上，用多层滤纸在轻轻加压下吸干胶内水分，然后将滤纸、胶膜与聚酯膜三者一起自然干燥，或用热吹风器吹干，干后胶膜会自然与滤纸及聚酯膜分开。

　　(6)染色：将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20～30min。

　　(7)脱色：用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰，背景基本无色。可在水中用两片玻璃纸将胶膜夹住，晾干后可长期保存。也可以用流水浸泡脱色至背景干净。

　　附注：

　　①抗原稀释倍数与抗血清用量的选择，应以火箭峰清晰、校准曲线斜率适中并成直线为宜。本法同时测定apoA-Ⅰ与apoB，应调整两种抗血清用量，使二者峰高有区别，apoB峰高不小于1cm。

　　②不同种类来源的抗血清(如兔与羊)，在等效价的情况下进行试验，结果会有差异。apoA-Ⅰ测定以兔抗血清为好。用兔血清时峰形尖细，而羊血清所产生的峰粗，峰尖圆钝，有时在峰顶前出现虚影。校准血清所作校准曲线斜率也不同。但不论用何种抗血清，定量结果差别不大。

　　③在一定条件下电泳，不同稀释度校准血清的峰高不会有明显变动，校准曲线斜率基本一致。如标本峰高超出校准曲线范围时，应调整标本稀释倍数后重测。板间CV通常小于5%。

　　④火箭电泳结果可以用染色法或直接肉眼观察可见的火箭峰。前者用标本少，节省抗血清，但如适当增加标本及抗血清用量，不染色更为方便。所用琼脂糖应为标准电渗或低电渗的，凝胶中加入适量葡聚糖或聚乙二醇可使火箭峰更清晰。

　　⑤火箭峰的测量可以计算面积或峰高，面积是峰高乘以峰宽(峰半高处的宽度)。测量精度最好能达0.1mm。须用机械或电子放大设备。标准曲线范围内峰高以1～4cm为宜。

　　⑥本法适用于少量标本分析。也适用于apoAⅡ、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E及Lp(a)测定。

适宜人群：

　　血脂高的患者。

不适宜人群：

　　无。

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