生殖器疱疹主要是由单纯疱疹病毒(HSV)Ⅱ型引起的一种性传播疾病,病毒可沿周围感觉神经纤维进入感觉神经或自主神经节潜伏下来,一旦有诱因刺激,如感染、月经期、受寒、免疫抑制,可出现生殖器疱疹复发。确诊生殖器疱疹需要做以下检查:
(一)细胞学方法
在皮损处刮片做Wright-Giemsa (Tzanck试验)或Papanicolaou染色,可检出具有HSV感染特征的巨细胞包函体,但不能与水痘,带状疱疹病毒感染区别,其敏感性仅为病毒分离的60%。
(二)培养法
从水疱底部取材做组织培养分离病毒,为目前最敏感、最特异的检查方法,需5~10天。因其技术条件要求高,价格昂贵,故未能普遍使用。
(三)抗体检测
目前使用最广泛的是HSV-Ⅱ抗体检测,如蛋白印迹法,也可用gD2作抗原检测HSV-Ⅱ抗体,具有敏感且能区分HSV-I和HSV-Ⅱ的优点。
(四)基因诊断
1.用PCR分型检测单纯疱疹病毒:聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种敏感性高、特异性强的快速检测方法,只要标本中含有lfg的HSV-DNA就可以将其检出。PCR在HSV感染诊断的研究中发展较快,分型检测HSV是发展的趋势。
2.套式PCR:套式PCR(nested primers-polymerase chain reaction,NP-PCR)是通过“外侧¨和“内侧”两对引物,即一对扩增较大DNA片段的“外侧”引物和一对位于扩增产物中再扩增小片段的“内侧”引物,这样两次连续放大可以提高PCR检测的灵敏度,保证产物的特异性。该方法能100%检出HSV-I,50%检出HSV-Ⅱ,但不能对HSV进行分型,应改进HSV分型检测,更好地在临床应用和在基础研究中推广应用。
3.聚合酶链反应-酶谱法:聚合酶链反应-酶谱法(polymerase chain reaction-endonucleasecleavage,PCR-FC)不仅能一次性分型检测HSV-I、HSV-Ⅱ、EBV、CMV等四种病毒,而且方法本身快速、方便、无放射线损伤,易被实验室接受。PCR-EC灵敏度高,可检出3个CFU的HSV-I,能检测出中枢神经系统感染第1天CSF中的HSV DNA,并可用于药物治疗效果的评价。由于病毒的变异性,会出现酶切点突变丢失现象,从而造成酶切阴性结果。这可以通过型特异性探针或序列分析解决。
4.RNA的聚合酶链反应:RNA的聚合酶链反应(RIA-PCR),不仅能通过检测不同期HSV的RNA来诊断HSV感染,而且有利于HSV的潜伏期感染机制的深入研究。RNA-PCR是以RNA为模板经逆转录反应(RT)产生cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增以达到检测目的。因此,RNA-PCR也可称为RT-PCR。
(五)病理组织学诊断
细胞内水肿,基底层形成大水疱,病灶周围有多核巨细胞浸润,特别是多核白细胞与淋巴细胞充斥于病灶中间。
一般根据患者症状可疑诊该病,采集溃疡面分泌物进行显微镜检查,可以很快作出诊断。为确诊,则可将溃疡区的拭子送专门实验室进行培养,一般可在48小时内获得结果。血清试验可提示过去感染,若抗体呈不断上升趋势,可提示近期感染。
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