1.痰结核菌检查 为确诊肺结核最特异性方法。厚涂片抗酸染色镜检快速简便，阳性率高，假阳性少，为目前普遍推荐。痰抗酸杆菌阳性提供初步诊断。据估计痰涂阳性其结核菌最低浓度为10个/ml，50%～80%肺结核患者痰涂阳性。结核菌培养可以与其他抗酸杆菌得以鉴别，除非已经化疗者偶可出现涂片检查阳性培养检查阴性，在未治疗的肺结核培养的敏感性和特异性均高于涂片检查。培养菌株进一步作药敏测定，可为治疗特别是复治提供重要参考。涂阳(涂片检查阳性)病例化疗7～10天内对实验室结核菌生长极少影响，而仅有极少量排菌的涂阴(涂片检查阴性)病例化疗迅速影响培养结果，故必须在化疗开始前留取标本。在无痰和不会咳痰的低年儿童清晨抽取胃液检查结核菌，必要时仍是一种值得采用的方法。在成人应用雾化导痰或经气管穿刺吸引采样，亦是可供选择的采样方法。结核菌培养的最大缺点是生长缓慢，需要4～6周才见菌落，若连续作药敏检测则需3～4月之久，而且还存在阳性率尚欠理想和难于标准化等问题。由于结核菌DNA合成所需酶的结构异常，长期来关于快速培养的研究均无突破。目前应用Bactec460TB系统解决了结核菌快速检测的难题。这采用含放射性14C棕榈酸为底物的7H12分枝杆菌培养基，当检测标本接种于该培养基后，若有分枝杆菌存在，则其代谢产物与底物作用生成14CO2后者送入电离室，并自动显示测定结果。加入NAP(P-nitro-acetylamino-β-hydroxypropiophenone)药物便可与非典型分枝杆菌相鉴别。此系统亦可进行抗结核药物的敏感性测定。多数应用表明，Bactec系统用于分枝杆菌的检测平均9天、结核菌鉴别5天、药敏试验6天即能完成，便检测时间显著缩短，与常规方法符合率极高。其缺点是设备及试剂昂贵，而且可能低估耐药性。老年人结核误诊率高，病变范围较广，易形成空洞，故痰查结核菌阳性率较高，可高达85.9%。
2.结素试验 结素是结核菌的代谢产物，主要成分为结核蛋白，从液体培养基生长的人型结核菌滤液制备而成。旧结素(OT)抗原不纯，可引起非特异性反应。纯蛋白衍生物(PPD)优于OT，以硫酸作沉淀制成的PPD-S经WHO定为哺乳类国际标准结素，而WHO委托丹麦生产的定名为PPF-RT-32(加Tween80稳定剂)的结素为国际上所广泛采用。但是PPD抗原仍然比较复杂。结素试验常用皮内注射法。以0.1ml结素释液于左前臂内侧皮内注射，使局部成皮后，48～72h观察和记录结果。不同结素制剂0.1ml的相应效价和含量见表1。流行病学调查和临床一般均以5TU为标准剂量。结果判断以72h局部肿结直径大小为依据：≤4mm阴性(-)，5～9mm弱阳性反应(+)，10～19mm中度阳性反应(++)，≥20mm或虽然不超过此直径但不水疱，坏死，为强阳性反应(+++)。短期重复试验可引起复强效应，故临床应用直接采用标准剂量，不主张从小剂量开始逐渐增加，重复试验。老年人由于免疫功能低下，结核菌素试验阳性率低且≥70岁者更低仅10%左右。
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