病原血清学检查即可诊断。
乙肝表面抗原(HBsAg)阳性：乙肝病毒表面抗原(HBsAg)是乙型肝炎病毒(HBV)的外膜蛋白，可在感染HBV后早期出现。乙肝表面抗原(HBsAg)是乙肝病毒的外壳蛋白，本身不具有传染性，但它的出现常伴随乙肝病毒的存在，所以它是已感染乙肝病毒的标志。它可存在于患者的血液、唾液、乳汁、汗液、泪水、鼻咽分泌物、精液及阴道分泌物中。在感染乙肝病毒后2～6个月，当丙氨酸氨基转移酶升高前2～8周时，可在血清中测到阳性结果。急性乙型肝炎患者大部分可在病程早期转阴，慢性乙型肝炎患者该指标可持续阳性。
乙肝表面抗体(抗HBs)阳性：至少说明三个问题：(1)乙肝病人到了恢复期，从此即将告别乙肝病毒感染;(2)既往感染过乙肝病毒，可能患过乙肝病，也可能是不知不觉中的隐性感染，但现在病毒已被清除，获得了对乙肝的免疫，即使有乙肝病毒侵入体内，也仍然安然无恙;(3)单纯抗-HBs-项阳性，是注射乙肝疫苗并免疫成功的标忐，当然也不会再感染乙肝病毒了。
乙肝e抗原(HBeAg)阳性：乙肝e抗原是乙肝病毒感染的直接指征，它的持续阳性表示病毒有活动性复制，因而可提示疾病慢性化，可能会导致慢性肝炎、肝硬化。
核心抗体(抗HBc)阳性：人感染乙型肝炎病毒后，血清中首先出现乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)，约1个月后出现乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原(H BeAg)，尔后出现抗-HBc等。随着病情的逐渐好转，血清中HBV-DNA、 HBsAg和HBeAg先后转为阴性，在HBsAg消失后隔一段时间，出现乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)。此时抗-HBc与抗-HBs可同时阳性。由于抗-HBs在血清中持续存在时间较抗-HBc短，因此，经过一段时间后，抗-HBs消失，仅单项抗-HBc阳性。无论是有临床症状的乙型肝炎病人还是没有临床表现的隐性感染者，他们康复后，血清学检查均可表现为单项抗-HBc阳性。
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