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微小病毒819感染的诊断

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　　诊断检查：

　　1.微小病毒819感染的临床表现

　　患儿有上述症状和体征，特别是溶血性贫血患儿发生再障危象，或接受化疗、免疫抑制剂的患儿，发生不明原因的突发全血细胞减少或贫血时，应警惕B19病毒感染。作网织红细胞和骨髓的检查，并收集血清等标本进行特异性检测，以确定微小病毒819感染的诊断。

　　2.病毒血清学检查

　　检测特异性lgG和lgM是诊断B19感染的基础。在免疫功能正常的人群，仅IgM抗体阳性是急性感染标志，仅IgG抗体阳性是既往感染的标志。两者同时均阳性表明近期感染。在临床上，90%的传染性红斑或再生障碍危象的患者，微小病毒819感染患者发病几天内就可检出特异性IgM抗体，在13天检出IgG抗体。IgG抗体的检测尚用于流行病学调查和易感人群的分析，特异性IgG抗体对B19感染有保护作用，检测抗体的方法有酶联免疫吸附法(ELISA)和放射免疫法(RIA)等。所用的抗原来源曾较困难，主要用急性期B19病毒滴度高的血清作抗原。最近表达成功的VPI蛋白，提供了抗原的新途径，并可用于免疫荧光法检测抗体。

　　3.电子显微镜

　　由于在体外，仪可在人骨髓中B19病毒才能增殖，尚无培养的细胞系可利用，故目前尚不能用常规的病毒分离法来检测B19病毒。电子显徽镜能从超微结构直接观察病毒，提供病毒形态学及存在状态证据。微小病毒819感染患者电镜一般可以检测到血清中l0^6/ml以上病毒颗粒，从而使敏感性低于DNA的核酸杂交水平，即可以检测到10^4/ml的病毒颗粒，但因电镜可以直接看到病毒，因而能提供病毒状态的信息，即它们在血清中是分散的、不凝聚状态，还是以免疫复合物的形式存在，因此特异性更强。

　　4.分子生物学技术

　　即核酸杂交和聚合酶链反应(PCR)技术。核酸杂交技术主要有原位杂交、斑点杂交和Southern印迹。该技术特异性强、敏感性可达0.1pg，且可对病变进行组织细胞定位。PCR技术是诊断B19感染最敏感和特异的方法，其敏感性比分子杂交高100~1000倍。而最近建立的巢式PCR技术敏感性与特异性更高，特异性的内引物产物相当于核酸杂交的探针一样，因而在发达国家的实验室已作为常规的微小病毒819感染的诊断方法。

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