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HIV感染的诊断

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　　诊断检查：

　　1.实验室检查：

　　1.1.抗HIV-1和抗HIV-2的检测：间接法的酶联免疫吸附试验用于初筛检测。试验方法要求敏感性高，不能出现假阴性，但允许有少量的假阳性，为此应挑选质量好的试验盒。最近又发展了快速简便的检测方法，如明胶颗粒凝集法、乳酸凝集法、快速全血凝集法等，这些方法只需数分钟就可得结果，其操作简便，步骤简单，不需要特殊仪器设备，结果易于判断，对数量大的检测较合适。日前有文献报道，不仅从感染者血清中检测到抗体，也从尿和唾液中检测到抗HIVlgG。最近还有报道检测抗HIV IgA亦有助诊断。目前各种试验盒均同时能测抗HIV-1和抗HIV-2，常用方法如下述。

　　1.1.1.颗粒凝集法：方法简单，适用于大批量初检，是将提纯的HIV抗原包被在红细胞或明胶颗粒上，制成致敏颗粒，当被检血清中有抗HIV存在时，即可与致敏颗粒起凝集反应，可判断为阳性结果，无凝集者为阴性。此法操作简单，结果出现快，不需任何仪器设备，但敏感性和特异性较酶联免疫差。

　　1.1.2.酶联免疫法：其原理是将HIV抗原包被在96孔板上或其他固相载体上，其原理是将HIV抗原包被在96孔板上或其他固相载体上，加入特检血清，如血清中有抗HIV则与之结合，经洗涤后加入酶酶抗人球蛋白IgG，再加入底物，用显色显判定血清中是否有抗HIV抗体。此法敏感性高，但容易出现假阳性结果，故阳性者需用其他试剂盒重复做一次，如两次均为阳性，则可判为阳性或进一步作蛋白印迹法确诊之。

　　1.1.3.免疫荧光法：是将HIV感染的细胞作为抗原固定于玻片上，其上加入不同稀释度的待检血清，经孵育后洗涤，再加荧光标记的抗人IgG，在荧光显微镜下检查，见细胞内有荧光标记者为阳性结果。此法敏感性高，但存在非特异性，且需要熟练的技术员来判定结果。

　　1.1.4.蛋白印迹法：

　　原理：HIV经粉碎后，其不同蛋白成分在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，按其蛋白分子大小排列于凝胶上，形成若干条特异的HIV蛋白区域，经印迹技术被转录于硝基纤维膜上，用适当浓度的不相关蛋白封闭非特异蛋白部位后，再与待血清孵育抗HIV特异蛋白抗体与其对应的蛋白相结合，经洗脱除去非特异结合的血清成分，通过酶标抗人IgG和底物显色，出现有颜色的条带，然后根据不同带型为诊断提供较正确的信息，临床用来判断是否存在HIV感染。

　　蛋白印迹法判断的标准：美国疾病控制中心确认标准为P24、gp41、gp120、gp160中出现2条以上阳性，即可判断为阳性。

　　世界卫生组织确认阳性标准(1988年)为1条cnv带加1条pol带;或1条env带加1条gag带;或2条env带为阳性时，均判为确认试验阳性。

　　根据卫生部90-2号文件，我国的阳性确认标准为至少有1条env(gp160、g0120、g041)带和l条pol(p65、p51、p32)带;或至少有1条env带和1条gag(p55、p24、p18)带;或至少有1条cnv带、1条gag带和1条pol带;或至少2条env带。

　　阴性者无病毒特异带。

　　可疑的是：1条gag带和1条pol;或只有gag带;或只有pol带。

　　1.2.抗原检测

　　1.2.1.病毒分离：是一种可靠的确定病毒存在手段，但操作复杂，需时较长，且需有P3实验室才能进行。

　　1.2.2.P24抗原的检测：是用鼠的抗ⅢVP24的单克隆体制备的，待检血清中有P24就可与之结合，经酶标检测可鉴别阳性或阴性。

　　1.2.3.HIV RNA的检测：这是近年来最新的进展，是用PCR法检测的，目前国内尚无这类试验盒，有赖进口，价格昂贵。HIV RNA在HIV/AIDS患者体内量的多少直接反映病情，如增加很快不管是HIV或AIDS患者均需开始用药，可联合用逆转录酶抑制剂和蛋白酶抑制剂，将使病毒在体内的数量下降，存活期延长，并减慢HIV进展至AIDS。

　　1.3.其他实验室的检查

　　1.3.1.CD4细胞的计数：

　　流式细胞仪检测CD4和CD8总数。

　　酶标记抗CD4和CD8来检测血中的CD4和CD8计数。

　　1.3.2.其他机会感染病原或抗体的检测

　　卡氏肺孢子虫的检查：可收集痰或支气管分泌物、支气管灌洗液，或肺活检制成涂片或切片，用姬姆萨或苏木素-伊红染色找卡氏肺孢子虫或滋养体。

　　隐孢子虫检查：从大便涂片中找隐孢子虫。

　　真菌的检查：直接涂片检查可见特殊的真菌孢子和菌丝，对隐球菌可取脑脊液涂片用墨汁染色，最特异的是可见隐球菌有芽生。

　　弓形体、病毒性肝炎及巨细胞病毒等抗体的检测：可用ELISA或EIA法分别检查。

　　细菌的检测：对结核杆菌可取痰、脑脊液作涂片，然后用抗酸染色检查。其他细菌可分别作血或分泌物培养。

　　淋巴瘤或卡波济肉瘤：要取活检送病理做切片检查。

　　2.诊断

　　2.1.小儿HIV/AIDS的诊断标准：小儿有其特殊性，因血中抗体可能来自母亲，故需随诊观察18个月以上，如P24抗原阳性，才能确定是感染了HIV。

　　2.2.成人诊断标准：

　　2.2.1.确诊病例：HIV感染者：有流行病史，抗HIV阳性，并经WB确诊;急性HIV感染者系高危人群在随访过程中抗HIV阳转。经确诊试验证实。

　　AIDS患者，除有流行病史和临床表现和抗HIV阳性外，还有抗HIV(+),CD4总数<0.2×10^9/L或(0.2~0.5)×10^9/L;并找到上述各种机会感染的病原(或抗体)，或肿瘤的病理依据。

　　2.2.2.可疑病例：

　　有流行病史和临床表现，但抗HIV(-)

　　有HIV(+)者所生子女

　　有流行病史，临床表现不明显，CD4总数<0.2×10^9/L

　　有口腔念珠菌感染、卡波济肉瘤、卡氏肺孢子虫肺炎、隐球菌脑膜炎或进展迅速的肺结核等，均属临床可疑病例，需要追随抗HIV。

　　3.鉴别诊断：急性期要与传染性单核细胞增多症相鉴别，全身淋巴结肿大要与淋巴瘤，白血病鉴别，至AIDS期由于各种机会感染，常不容易考虑到HIV感染，只看到白色念珠菌、隐球菌感染、肺结核、卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)而漏诊，特别是PCP须注意和SARS相鉴别。

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