1.实验室检查:
1.1.免疫学检测
1.1.1.抗原检测:用免疫酶方法(EIA)、免疫荧光法(1FA)及乳胶凝集试验等方法可进行HSV的抗原检测.具有较高的特异性和敏感性,可用于临床诊断和病毒鉴定。
1.1.2.抗体检测:HSV—l亚型和HSV-2亚型的抗体检测是临床上最常用的HSV感染检测方法,有更高的特异性和敏感性。常用的是以ELIsA法检测抗HSV糖蛋白gG的抗体,抗HSV gG-IgM抗体阳性握示有现症感染,抗HSVgG-IgG抗体阳性提示曾有HSV感染。
1.2.核酸检测
1.2.1.PER检测:PCR技术有较高的特异性和敏感性,可在数小时内做出检测报告,但易产生假阳性,且需要特殊的仪器和试剂,在基层医院尚未广泛采用。应注意在操作过程中避免污染,必要时加做确认实验例如桉酸分子杂交,甚至限制酶酶切分析,以排除PCR技术所可能导致的佃阳性反应。
1.2.2.核酸分子杂交:DNA探针作为一种HSV检测手段具有先进性和准确性,虽然其特异性很高,但敏感性相对较低.需要的实验条件及技术要求较高,一般不作为常规检测。
1.3.病理检查 将疱疹液、皮肤黏膜病灶刮取物或活检组织用荧光素标记或酶标记单克隆抗体进行免疫荧光染色或免疫组化染色,用荧光显微镜或光学显微镜可快速检测细胞内HSV特异性抗原。此外,病损处刮片的细胞学检查或病理组织活检可查见多核巨细胞及细胞核内嗜酸性包涵体,可有助于本病的诊断,但不能仅以此作为确诊的依据。
1.4.病毒分离培养 分离病毒进行细胞培养HSV是实验室诊断HSV感染的金标准。也是较为敏感的检测方法,并可采用细胞免疫组化技术进一步进行HSV-l、HSV-2的分型。HSV易于进行体外细胞培养,并能产生可见的细胞病变;故可用棉拭子在病损处采样或采集脑脊液等体掖标本接种细胞,培养分离病毒作出诊断;但由于细胞培养费时、费事,其技术条件要求较高,故难以在临床普遍推广,而多用于实验研究。
1.4.1.疱液涂片检查 取新鲜水疱疱底的疱液做涂片,可见一个或数个核的气球状细胞及嗜伊红性核内包涵体。
1.4.2.血清学检测:测定血清中和抗体、效价,对原发性单纯疱疹的患者,对诊断有帮助。土要用于回顾性诊断原发性感染.用于原发性单纯疱疹病毒(HSV)感染的回顾性诊断。
1.4.3.分子生物学检测:应用核酸分子杂交技术和聚合酶链反应技术,可以对病毒DNA或基因进行检测。应用DNA分子杂交技术检测HSV—DNA,其敏感性和特异性相当于免疫荧光试验。使用商品化的生物素标记探针,通过原位杂交技术可检测临床标本中HSV—DNA。聚合酶链反应(PCR)是成人及新生儿癌疹性脑膜炎的首选实验室诊断方法。PCR较病毒培养法及脑脊液HSV抗体检测更为敏感。
2.诊断和鉴别诊断:
2.1.诊断 凡体表部位具有典型疱疹损害者诊断不难;对损害仅存在于腔道深处,如生殖道、呼吸道、直肠的患者,倘疏于全面仔细的体检,则有可能误诊;对仅系内脏疱疹损害,而身体浅表等易暴露部局限性损害,或呈脑组织弥漫性病变,CT和MR等影像学检查显示有额、颞叶的软化灶;⑦双份血清和脑脊液HSV抗体检查有显著变化趋势;⑧病原学检查阳性,如PCR检测脑脊液提示有HSV感染等。通常有前5项改变即可诊断,有后3项更支持诊断。但应注意的是,流行病学资料有时并不一定能收集到。例如,在部分新生儿HSV感染者的生母中.并无单纯疱疹发病史或明确的接触史,从而给临床诊断造成很大困难。此类疑难病例的确诊有赖于采集临床标本,甚至活组织检查,以搜索单纯疱疹病毒感染存在的证据。疑新生儿及患有宫内HSV感染者,血清(可采脐血或足跟血标本)IgM型HSV抗体检测阳性即可确诊。
由于成年人群中有很高的HSV抗体检出率,大多获自隐性感染,且抗体的存在尚不能完全保护机体免受疱疹病毒的重复感染,故对于成人疑难病例.HSV抗体检测阴性有助于排除单纯疱疹(倘若存在免疫应答功能缺陷者即不在此例):而HSV抗体检测阳性则对临床诊断帮助不大,此时必须搜索单纯疱疹病毒在患者体内存在的直接证据,例如采用免疫荧光拉术检测单纯疱疹病毒抗原蛋白,采用原位杂交或PCR技术检测单纯疱疹病毒基因成分等。确诊可依据病毒培养,血清转换.血清中相应血清型抗体滴度升高(原发感染)及活检结果。
2.2.鉴别诊断
2.2.1.带状疱疹:体表部位的单纯疱彦应注意与带状疱疹鉴别。带状疱疹通常疼痛较剧烈,疱疹面积较广泛且沿皮区分布,很少复发。此外应与水痘。疱疹样皮眭病特别是疱疹样皮炎和药物性皮疹鉴别。
2.2.2.生殖器疱疹应与其他原因引起的生殖器溃疡鉴别。
2.2.3.原发性单纯疱疹可导致疱痔性龈口炎,当初起为局限性病灶时,可与阿弗他口炎相似.但原发性疱疹常侵及附着龈和其他组织.而阿弗他口炎不会侵及附着龈。
2.2.4.诊断单纯疱疹性脑炎需排除其他病毒性脑炎如乙型病毒脑炎、腮腺炎病毒脑炎、麻疹病毒脑炎等,同时也应注意排除脑脓肿、急性播散性脑脊髓炎、恶性肿瘤等疾病。
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