单纯疱疹系由单纯疱疹病毒(HSV)所致,多侵犯皮肤黏膜交界处,皮疹为限局性簇集性小水疱,病毒长期潜伏和反复发作为其临床特征。确诊单纯疱疹需要做以下检查:
1.免疫学检测
(1)抗原检测:用免疫酶方法(EIA)、免疫荧光法(1FA)及乳胶凝集试验等方法可进行HSV的抗原检测.具有较高的特异性和敏感性,可用于临床诊断和病毒鉴定。
(2)抗体检测:HSV—l亚型和HSV-2亚型的抗体检测是临床上最常用的HSV感染检测方法,有更高的特异性和敏感性。常用的是以ELIsA法检测抗HSV糖蛋白gG的抗体,抗HSV gG-IgM抗体阳性握示有现症感染,抗HSVgG-IgG抗体阳性提示曾有HSV感染。
2.核酸检测
(1)PER检测:PCR技术有较高的特异性和敏感性,可在数小时内做出检测报告,但易产生假阳性,且需要特殊的仪器和试剂,在基层医院尚未广泛采用。应注意在操作过程中避免污染,必要时加做确认实验例如桉酸分子杂交,甚至限制酶酶切分析,以排除PCR技术所可能导致的佃阳性反应。
(2)核酸分子杂交:DNA探针作为一种HSV检测手段具有先进性和准确性,虽然其特异性很高,但敏感性相对较低.需要的实验条件及技术要求较高,一般不作为常规检测。
3.病理检查 将疱疹液、皮肤黏膜病灶刮取物或活检组织用荧光素标记或酶标记单克隆抗体进行免疫荧光染色或免疫组化染色,用荧光显微镜或光学显微镜可快速检测细胞内HSV特异性抗原。此外,病损处刮片的细胞学检查或病理组织活检可查见多核巨细胞及细胞核内嗜酸性包涵体,可有助于本病的诊断,但不能仅以此作为确诊的依据。
4.病毒分离培养 分离病毒进行细胞培养HSV是实验室诊断HSV感染的金标准。也是较为敏感的检测方法,并可采用细胞免疫组化技术进一步进行HSV-l、HSV-2的分型。HSV易于进行体外细胞培养,并能产生可见的细胞病变;故可用棉拭子在病损处采样或采集脑脊液等体掖标本接种细胞,培养分离病毒作出诊断;但由于细胞培养费时、费事,其技术条件要求较高,故难以在临床普遍推广,而多用于实验研究。
5.疱液涂片检查 取新鲜水疱疱底的疱液做涂片,可见一个或数个核的气球状细胞及嗜伊红性核内包涵体。
6.血清学检测
测定血清中和抗体、效价,对原发性单纯疱疹的患者,对诊断有帮助。土要用于回顾性诊断原发性感染.用于原发性单纯疱疹病毒(HSV)感染的回顾性诊断。
7.分子生物学检测
应用核酸分子杂交技术和聚合酶链反应技术,可以对病毒DNA或基因进行检测。应用DNA分子杂交技术检测HSV—DNA,其敏感性和特异性相当于免疫荧光试验。使用商品化的生物素标记探针,通过原位杂交技术可检测临床标本中HSV—DNA。聚合酶链反应(PCR)是成人及新生儿癌疹性脑膜炎的首选实验室诊断方法。PCR较病毒培养法及脑脊液HSV抗体检测更为敏感。
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