正呼肠孤病毒感染检查报告单-正呼肠孤病毒感染检查什么项目-正呼肠孤病毒感染检查费用多少钱-第1页-家庭医生在线

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正呼肠孤病毒感染的诊断

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　　1.实验室检查：

　　1.1.电镜观察：由于病毒具有特殊的大小和结构.只要待检材料中有足量的病毒颗粒.就可直接用电镜鉴定。

　　1.2.病毒分离和鉴定：通常用恒河猴肾细胞和小鼠L细胞分离正呼肠孤病毒，也可使用其他细胞，如HeLa细胞。猴细胞转鼓培养有助干病毒生长。接种病毒的细胞放36～37℃培养，每日观察细胞病变作用(CPE)，共观察3周，需盲传一代。分离病毒的标本通常是粪便、喂或鼻拭干。尚无报道呼肠病毒可在鸡胚中生长。由于动物价格贵和有自然感染，一般不用于作病毒分离。

　　正呼肠孤病毒分离物可用血凝抑制试验(H1)或中和试验(NT)鉴定病毒。用于HI前需将分离物传1—2代以提高病毒高度。3型较l型和2型的血凝滴度低。如有单克隆抗体或其他型特异抗体.则用免疫荧光试验(IF)较简便。

　　血凝抑制试验定型血清用高岭土于室温吸附后，再加入1/10体积的50%人0型红细胞进行吸附以除去非特异的血凝素，4℃1小时后离心。取上清液用干试验。

　　HI用微量板法或试管法。用试管法时，将上述吸附过的血清用盐水作倍比稀释。取0.2ml血清与0.2ml含4个单位的血凝素混合。室温1小时再加入0 2ml红细胞，室温放置30分钟一2小时。用微量板法时，此步所需时间更长，至少3小时以上。

　　定型血清通常需有1：40以上的特异性血凝抑制滴度。每次试验都应设抗体和抗原对照。

　　也可用中和试验和免疫荧光试验鉴定病毒。但中和试验较繁琐，免疫荧光试验所用抗体需无型间交叉反应。

　　1.3.血清学检查：由于正呼肠孤病毒感染很普遍，而且血清抗体可持续1年以上，所以应该对急性期和恢复期血清同时进行检测。中和试骑、血凝抑制试验、补体结合试验、免痤荧光试验及酶联免疫吸附测定均可使用。

　　1.3.1.补体结合试验(CF);本试验适用于检测细胞(如MAl04，恒河猴肾细胞系)感染获得的病毒抗原。由于3个型的病毒含有共同的CF抗原，所以CF不能对待检抗体进行型别鉴定，因而诊断价值有限。

　　1.3.2.血凝抑制试验(HI)：同病毒分离物定型试验一样，本方法需使用吸附除去非特异性抑制物的血清，但人类血清通常不需经人0型红细胞吸附。试验中用感染细胞的病毒收获液作为检铡抗原。因2型正呼肠孤病毒株具有抗原异质性，试验中可能需要同时列入数株参考病毒。血清滴度以出示血凝反应完全被抑制的血清稀释度的倒数来表示。抗体滴度4倍以上升高判为有意义。在感染过程中，特别是在l型和2型感染中，可能诱导出同型及异型抗体。

　　1.3.3.酶联免疫吸附试验(EIISA)：操作简单，特异性及敏感度均较高，可用于流行病学调查及诊断。

　　1.3.4.中和试验(NT)：可用于流行病学调查，但操作比较繁琐。

　　1.4.分子生物学检测：用RT—PCR技术扩增呼肠病毒L1基因片段来检测肝和胆道组织中的病毒RNA，敏感且特异，可用于诊断。用逆转录原位PCR检测鸡组织切片上SigrnaC编码的鸟禽正呼肠孤病毒的基因，比原位杂交更敏感，是检测鸟禽正呼肠孤病毒感染迅速、敏感和特异的方法。用RT-PCR检测哺乳动物呼肠病毒RNA和荧光核酶RT—PCR检测3型病毒RNA，既敏感又特异，可用于早期诊断。

　　2.诊断和鉴别诊断：哺乳动物正呼肠孤病毒感染很普遍，主要是轻度和无症状感染。有上呼吸道感染和胃肠道感染症状、发疹性疾病的病人，尤其是儿童，应首先想到呼肠病毒感染。结合实验室检测呼肠病毒抗原和抗体，如用免疫荧光或免疫过氧化物酶染色在固定组织中直接检测病毒抗原，或采集急性期和恢复期双份血清检测血清转换，或用RT-PCR方法检测病毒基因，均有助于本病的诊断。

　　因人类正呼肠孤病毒感染没有特异性的临床表现，故在临床上应与所有有上呼吸道感染和胃肠道感染症状的疾病和发疹性疾病进行鉴别。在鉴别诊断中，应密切结合实验室检查，如检测正呼肠孤病毒的抗原和抗体、病毒分离和检测病毒HNA。

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